Tổng thống Hoa Kỳ Barack Obama chỉ đạo chính phủ liên bang cung cấp hỗ trợ cần thiết để "điều tra và ủng hộ cộng đồng".[30] Trong một bài diễn văn, Tổng thống mô tả vụ tấn công là "hành động căm thù" và "hành động khủng bố".[11][31][32][33] Ông cũng ban hành sắc lệnh rủ cờ trên khắp quốc gia.[34]

Thống đốc Florida Rick Scott đưa ra lời diễn văn hỗ trợ những người bị ảnh hưởng, khẳng định Trung tâm Tình trạng khẩn cấp đang xem xét vụ việc.[35] Ngoài ra, Scott thông báo Tình trạng khẩn cấp ở Orange County, Florida[36][37][38] và Thống đốc Orlando Buddy Dyer thông báo Tình trạng khẩn cấp trong thành phố.[39][40]

Mạng xã hội Facebook kích hoạt chức năng "Safety Check" sau cuộc tấn công, giúp người dùng đánh dấu "an toàn" và thông báo đến gia đình và bạn bè.[41][42] Nhiều người trên mạng xã hội, bao gồm ứng cử viên chức Tổng thống Hoa Kỳ, Thành viên Quốc hội, những nhân vật chính trị, Lãnh sự quán và người nổi tiếng bày tỏ niềm thương tiếc và bàng hoàng đến vụ tấn công.[43][44] Nhiều buổi cầu nguyện được tổ chức trên khắp thế giới để chia buồn với những người thiệt mạng trong vụ xả súng.[45][46][47]